广谱非限制性核酸酶

生物化学/生理学行为

消化天然或热变性的DNA和RNA。

广谱非限制性核酸酶是来自粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）的基因工程核酸内切酶。 该蛋白质是一个具有两个必需的二硫键的30kDa亚基的二聚体。 该核酸内切酶切割并降解所有形式的DNA和RNA（单链，双链，线性和环状），并且在广泛的操作条件下有效。 酶活性的最佳pH为8.0-9.2。 它将核酸完全消化为长度为3至5个碱基的5'-单磷酸端寡核苷酸。 这是从重组蛋白中去除核酸的理想方法，也适用于需要完全消化核酸的应用。 它还可以降低蛋白质提取物的粘度，防止细胞结块。 蛋白质样品的预处理通过完全去除其中的核酸，提高其在2D凝胶电泳上的分辨率。

单位定义

在37°C，pH8.0 的条件下，30 分钟内可将37μg 的底物DNA（鲑鱼精DNA)消化成为寡核苷酸（相当于使260nm 吸收值变化1.0）的核酸酶的量

物理形态

50％甘油的溶液中含有20mM Tris HCl，pH 8.0，2mM MgCl2和20mM NaCl。

应用

用于去除蛋白质样品中的核酸。

广谱非限制性核酸酶（全能核酸酶），或粘质沙雷氏菌内切酶，可用于降解所有形式的DNA和RNA，同时不具有蛋白水解活性。广谱内切酶也可用于微量热实验中制备蛋白质。

该酶已用于限制嵌合细胞混合物制备过程中的细胞聚集。 它还被用于通过消化DNA和释放与DNA密切相关的核蛋白来制备核提取物。