蛋白脱盐柱(5KMWCO,6ml)

蛋白脱盐离心柱是一种的改良葡聚糖脱盐装置，填料颗粒粒径在58-80微米，对于大于5K&30K MWCO的蛋白质可实现快速和出色的脱盐和高回收率。从100μL至 2mL 的样品提供无故障脱盐和缓冲液交换。

»高回收率—低结合树脂极大提高了蛋白回收率

»快速—无需筛选或等待依赖重力流出的蛋白

»经济—比其他市售预装柱更经济实用

»稳定—可重复使用

操作步骤

1.离心去除储存液。1000×g离心2min，去除储存液。

2.平衡预装柱。加入350μl样品所需的缓冲液，静置2min，1000×g离心2min。再加入200μl上述缓冲液，重复上述平衡操作2次。

3.样品处理。加入需要处理的蛋白样品，静置30S，1000×g离心2min，收集回收样品，保存备用。

脱盐柱重复使用保存方法

将使用过的脱盐柱，共4次加入200μl含2M NaCl的PBS溶液，静置2min，1000×g离心2min。然后3次加入200μl去离子水，静置2min，1000×g离心2min。将处理好的脱盐柱，加入20%乙醇溶液，保存即可。

注意事项

1.样品处理量要在柱子处理范围内，过多会导致脱盐不完全，过少会导致样品回收率下降；

2.填料在高浓度醇溶液或饱和盐溶液中会有失水收缩现象，请勿将上述溶液进行过柱；

3.加样时尽量均匀加至管中心位置；

4.当样品浓度过低时，需先将样品浓缩到所需体积或所需浓度。

常见问题

1.蛋白回收率偏低

分析：a、蛋白浓度过低（<0.01mg/ml)

b、所置换的缓冲液成分或PH非最适缓冲液，产生了非特异性吸附

处理：a、现对蛋白液进行适当浓缩后脱盐

b、更换适合的缓冲液，并充分平衡预装柱2-3次

2.蛋白回收后出现浑浊或沉淀

分析：a、缓冲液非最适缓冲液

b、缓冲液中的某些离子被除去了，导致蛋白质等电点聚沉

处理：更换适合的缓冲液，并充分平衡预装柱2-3次

3.脱盐不干净

分析：盐离子浓度过高（>0.5M）

处理：根据盐离子浓度适当增加脱盐次数或稀释后脱盐

推荐上样量：