核酸释放剂NF-2，通用型

核酸释放剂NF-2/NF-3/NF-4可直接裂解释放样品核酸（DNA/RNA），无需核酸抽提，直接取混合液上清作为模板进行核酸PCR扩增或恒温扩增，且缓冲液对核酸扩增的酶有特异性保护。

核酸释放剂NF-2/NF-3/NF-4适用于所有临床样品（唾液、新鲜全血、血清、肺泡冲洗液、尿液、组织、环境）中细胞(真核、昆虫等)和病原体（病毒、支原体、衣原体、细菌等）采集后的高效灭活。

混合液无需再抽提核酸，可直接取上清作为模板进行PCR或者恒温扩增检测。扩增效率较核酸抽提核酸后核酸扩增效率低2～4个Ct值，释放核酸后进行荧光PCR检测的灵敏度可达5个细胞，约500～1000copies/mL。

可常温长时间保存释放出的病原体核酸，其中常温保存释放出的RNA 7天不降解，常温保存释放出的DNA　6个月不降解。

不同样本的释放步骤

 1.血清、血浆、唾液、稀痰液、尿液、非PBS拭子、非胍盐采集液、细胞培养液等液体样本

       ① 取释放剂 150μL置于1.5mL离心管内，加入液体样本50μL，反复吹打混匀2-5次，室温（22～25℃）放置作用≥2min。

       ② 若是新鲜全血，则取10μL全血，加入100μL 释放剂中，反复吹打混匀2-5次，室温（22～25℃）放置作用≥2min。

2.EDTA抗凝血样本、完全溶血样本、浓痰液、腹水样本、高浓度PBS溶液样本，

        需要先用DEPC水10倍稀释，再按液体样本：释放剂=1:3进行释放，如取稀释10倍后的样本50μL，再加入释放剂 150μL，混合后室温放置静止作用≥2min。

3.组织固体样本

       取释放剂 300μL置于1.5mL离心管内，再加入黄豆大小充分剪碎的组织样品，反复吹打混匀3-5次，室温（22～25℃）放置作用≥5min。

       注意：亦可加入生理盐水组织匀浆后上清液，按照液体样本进行操作。 

释放剂NF-2通用型扩增取样

       直接取混合液上清2.5μL作为核酸扩增模板，进行实时荧光或常规PCR扩增，或者恒温扩增（LAMP、RPA、RCA等）。注意：模板的体积应≤核酸反应总体积的10%。即25μL的反应体系加入的混合上清不超过2.5μL，50μL的反应体系加入的混合上清不超过5μL。

       注意：不要为提高灵敏度，加大模板的上样量，上样量过大反而抑制反应，影响灵敏度，甚至扩增不出来。