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mRNA专用转染试剂

Braveds
概述

一款高性能的mRNA专用转染试剂, 可用于mRNA在多种贴壁细胞中的传送。可直接将mRNA传递到细胞 质中进行表达,避免了转录调控作用及进入细胞核的限制。可被应用 在短期蛋白表达的相关研究工作中。

可适用于众多贴壁或悬浮细 胞株的mRNA转染。在各种常规、难转、原代细胞及干细胞中均可得 到较高的转染效率,且性能稳定。与其它转染试剂相比,具有不受血 清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。

转染步骤

以24孔板举例:

1.细胞接种: 每孔接种0.5~1.0×105个细胞,细胞培养 12~24小时,使转染时细胞密度达到60~70%融合度

2.mRNA稀释: 将0.5µg的mRNA加入到Opti-MEM培养基 中,稀释后的终体积为10µL

3.转染试剂稀释: 取1μL的mRNA专用转染试剂加入到9μL 的Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL

4.复合物制备:将上述mRNA稀释液和转染试剂稀释液混合, 轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟

5.将上述20µL复合物加入到24孔板中,轻轻吹打混匀,继 续培养18~48小时后检测转染效率,无需更换培养基

mRNA的转染优化:

可通过改变细胞密度、 mRNA浓度以及mRNA专用转染试剂浓 度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,mRNA专用转染试剂(µL): mRNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整。

 

 

不同培养板所需转染试剂和mRNA的用量

培养板

单孔面积

接种培养基

Opti-MEM稀 释后终体积

mRNA转染

试剂用量

mRNA

96孔板

0.3cm2

200ul

10ul

0.4ul

0.2ug

24孔板

2.0cm2

500ul

20ul

1.0ul

0.5ug

12孔板

4.0cm2

1ml

40ul

2.0ul

1.0ug

6孔板

10.0cm2

2ml

100ul

4.0ul

2.0ug

60mm

20.0cm2

5ml

0.2ml

8.0ul

4.0ug

10cm

60.0cm2

15ml

0.6ml

24.0ul

12.0ug

 

 

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